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在哺乳动物细胞中表达和 鉴定核酶及短发夹RNA实验一构建和表达以寡核苷酸为基础的反义盒
来自 : 发布时间:2025-04-04
实验步骤

构建和表达以寡核苷酸为基础的反义盒

材料

试剂

25.将混合物与细胞共同孵育(期间不需更换培养液)直到转染后24h。

26.吸出培养液,向每孔加人150ul被动裂解缓冲液(在双萤光素酶报道系统试剂盒中提供),室温下轻柔振荡培养15min。

27.在荧光/化学发光检测仪上测量报道基因的表达(参照双萤光素酶报道系统试剂盒的操作手册)。

28以内部对照萤火虫萤光素酶为标准,规格化所有样品目标特异性

Renilla萤光素酶的表达。设定对照组(转染无关效应因子的细胞)的表达效率为1〇〇%,对照计算其他样品的相对表达水平。至少进行两次独立的平行实验,选择两个构建好的并证明高效表达效应因子的样品,用于进一步的研究。

本文链接: http://probetex.immuno-online.com/view-1533244706.html

发布于 : 2025-04-04 阅读()